Protein-Protein Etkileşimlerini Tespit Etmek için Grafen Biyosensör Tabanlı Alan Etkili Biyoalgılama

Protein-protein etkileşimleri, PPI'ler, çoğu biyolojik sürecin düzenlenmesinde kritik öneme sahiptir.

Alan etkili biyoalgılama kullanarak PPI'leri tespit etmek için, grafen alan etkili bir transistör çipi ile başlayın. Çip, kaynak ve drenaj elektrotları arasındaki yarı iletken kanal olarak karboksil ile işlevselleştirilmiş bir grafen yüzeyi içerir.

Çipi, bir zwitteriyonik tampon içinde taze bir karbodiimid ve N-hidroksisülfosüksinimid, sülfo-NHS çözeltisi ile inkübe edin. Bu tampon, karbodiimid ve sülfo-NHS'nin çipin işlevselleştirilmiş karboksil gruplarını aktive etmesini ve amin-reaktif esterler oluşturmasını sağlayan uygun bir pH oluşturur.

Hedef protein çözeltisini ekleyin. Birincil aminler, amin reaktif esterlerle reaksiyona girerek, amid bağı oluşumu yoluyla çip üzerindeki proteinleri hareketsiz hale getirir. Bağlanmamış amin-reaktif esterleri bloke etmek için amin içeren söndürme çözeltisi ekleyin, spesifik olmayan bağlanmayı önler.

Çipi elektronik okuyucuya yerleştirin ve bir tamponla kalibre edin. Okuyucu, elektrotlar arasında sabit bir voltaj uygular. Analit-bağlanmamış durumdaki elektrotlar arasında ortaya çıkan elektrik akımı akışı ölçülür.

En düşük analit konsantrasyon