JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Biyolojik Teknikler
0 görüntülenme • 4:16 dk. • July 8th, 2025
Sinir sisteminde, transsellüler etkileşimler - spesifik sinaptik hücre adezyon molekülleri, transmembran proteinler, presinaptik ve postsinaptik nöronlar üzerindeki etkileşimler - sinapslarda trans-sinaptik sinyalleşmeye aracılık eden bir kompleks oluşturur.
Bir hücre agregasyon testi yoluyla insan embriyonik böbrek hücreleri üzerinde eksprese edilen sinaptik hücre adezyon molekülleri arasındaki transcellite etkileşimleri tespit etmek için, transfekte edilmiş hücre süspansiyonları ile başlayın.
Bir transfekte hücre popülasyonu, istenen presinaptik hücre adezyon molekülünü ve yeşil floresan proteini ifade eder; diğeri spesifik postsinaptik hücre adezyon molekülünü ve kırmızı floresan proteini eksprese eder. Yeşil ve kırmızı floresan proteinleri ifade eden iki hücre popülasyonu da elde edilir.
Hücreleri santrifüjleyin. Hücreleri, kalsiyum iyonları ile takviye edilmiş uygun ortamda yeniden süspanse edin. Her iki popülasyonun transfekte edilmiş hücrelerini bir tüpte eşit olarak karıştırın. Diğer hücre popülasyonları için tekrarlayın.
İnkübasyon sırasında, kalsiyum iyonları, bir hücre popülasyonunda eksprese edilen presinaptik protein üzerindeki belirli bir bölgeye bağlanır. Bu, presina
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin