JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Biyolojik Teknikler
0 görüntülenme • 3:36 dk. • July 8th, 2025
Enerji tüketen mikrogravimetri yoluyla bir fosfolipid bağlayıcı protein ile bir lipid çift tabakası arasındaki etkileşimi incelemek için kuvars sensörlü bir mikro terazi alın. Uygun bir voltaj uygulandığında, iki metal elektrot arasına sıkıştırılmış kuvars tabakası belirli bir frekansta salınır.
Sensörün üzerine, tek bir lipid çift tabakasından oluşan küçük unilamellar veziküllerden oluşan bir süspansiyon ekleyin. Veziküller, silika kaplı hidrofilik yüzey üzerinde adsorbe olur - sensör kütlesini arttırır ve salınım frekansını orantılı olarak azaltır.
Tampon dolgulu veziküller, viskoelastik bir tabaka görevi görür ve dağılmaya yol açar - salınımın sönümlenmesi. Adsorbe edilen veziküller yırtılır ve kapalı tamponu serbest bırakır. Sonuçta ortaya çıkan kütle azalması salınım frekansını arttırır.
Yırtılmış veziküller, biyolojik bir zarı taklit eden sürekli bir çift tabaka oluşturur. Çift tabakanın sertliği dağılımı azaltır.
Hedef proteinle birlikte kalsiyum iyonları içeren bir tampon ekleyin. Kalsiyum iyonları proteine bağlanır ve konformasyonunu değiştirir - çift tabakadaki lipit moleküllerine bağlanmayı sağlar.
Protein bağlanması, sensörün kütlesini artırır ve frekansın azalmasına ne
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin