JoVE Deneyler Ansiklopedisi
İmmünoloji
0 görüntülenme • 4:56 dk. • July 8th, 2025
Yetişkin somatik hücreler, kök hücre benzeri farklılaşmamış ve proliferatif durumlar sergileyen indüklenmiş pluripotent kök hücreler, iPSC'ler elde etmek için genetik olarak yeniden programlanabilir.
İnsan iPSC'lerini makrofajlara (patojenleri ve hücresel kalıntıları fagositoz eden beyaz kan hücreleri) ayırmak için, hücre dışı yapışkan bir yüzeye sahip bir kültür plakası ile başlayın.
Büyüme faktörleri, kemik morfogenetik proteini, kök hücre faktörü ve vasküler endotelyal büyüme faktörünü içeren ortamı ekleyin. iPSC'leri tohumlayın ve kuluçkaya yatırın.
Yapışkan olmayan yüzey, iPSC bağlanmasını önler ve hücreleri süspansiyon halinde tutar, bu da üç boyutlu embriyoid cisimlere (EB'ler) agregasyonu kolaylaştırır. Büyüme faktörleri, EB'ler içinde mezodermal soy hücrelerine iPSC farklılaşmasını başlatır.
Farklılaşmış EB'leri bir santrifüj tüpüne aktarın. Yerçekimi ile yerleşmelerine izin verin. EB'leri interlökin-3, IL3 ve makrofaj koloni uyarıcı faktör, CSF1 içeren taze ortamda yeniden süspanse edin. EB'leri jelatin kaplı bir hücre kültürü plakası üzerine yerleştirin.
Hücre dışı bir matris proteini olan jelatin, EB bağlanmasını kolaylaştırır. IL3, EB'leri hematopoietik kök progenitör
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin