Bir Fare Peyer Yamasından Lenfositlerin İzolasyonu

Peyer yamaları, PP'ler, ince bağırsak duvarındaki organize lenfoid dokuların agregatları, B lenfositleri, T lenfositleri, dendritik hücreler ve makrofajlar dahil olmak üzere bağışıklık hücreleri içerir.

Lenfositleri fare PP'lerinden izole etmek için ötenazi yapılmış bir fare ile başlayın. Karın duvarını kesin, periton boşluğunu açığa çıkarın. Çekumu bulun. Çek kemiğini ince bağırsaktan ayırmak için ileoçekal bileşkeyi inceleyin.

İnce bağırsağı periton boşluğundan çıkarmak için mezenteri eksize edin ve ince bağırsağı duodenumdan kesin. İnce bağırsağı soğutulmuş ortam içeren çok kuyulu bir plakaya yerleştirin ve kalıntıları gidermek için durulayın.

İnce bağırsağı mezenterik tarafı aşağı bakacak şekilde konumlandırın ve doku hidrasyonunu korumak için orta ile nemlendirin. PP'leri tanımlayın - bağırsak duvarının anti-mezenterik tarafındaki beyaz çok loblu agregalar.

Çevredeki bağırsak dokusu hariç PP'leri dikkatlice çıkarın. Ortam içeren bir tüpe aktarın. Sürekli çalkalama altında inkübe edin. Bu çalkalama adımı, mukusu, hücre kalıntılarını ve herhangi bir dışkı maddesini PP'lerden ayırır, böylece PP lenfositlerinin geri kazanımını iyileştirir.

Daha sonra, dokuyu uygun bir ağ boyutuna