Ortak Lenfoid Progenitörlerden Plazmasitoid Dendritik Hücrelerin İn Vitro Üretimi
JoVE Deneyler Ansiklopedisi
İmmünoloji
0 görüntülenme • 4:39 dk. • July 8th, 2025
Plazmositoid dendritik hücreler veya pDC'ler, sitokin tip-I interferon üreterek enfeksiyona yanıt veren bağışıklık hücreleridir.
İn vitro pDC'ler oluşturmak için, fare kemik iliğinden izole edilen ortak lenfoid progenitör hücrelerin veya CLP'lerin bir süspansiyonunu alın. CLP'ler lenfositlere ve dendritik hücrelere farklılaşabilir.
Hücre süspansiyonunu, proliferasyonu inhibe etmek için gama ışınları ile ışınlanmış bir besleyici hücre tabakası - yapışık stromal hücreler - üzerine ekleyin. Besleyici hücreler, CLP'lerin farklılaşması için gerekli olan sitokinleri ve hücre-hücre temasını sağlar.
Yeterli konsantrasyonda Fms benzeri tirozin kinaz 3 ligandı veya FL - pDC gelişimini destekleyen iki değerlikli bir sitokin - ekleyin ve inkübe edin.
CLP'ler besleyici hücreler arasında göç eder ve parke taşı alanları olarak adlandırılan hücre grupları oluşturmak için çoğalır.
Ortamdaki FL, CLP'ler üzerindeki Flt3 reseptörüne - bir tirozin kinaz reseptörü - bağlanır. Bağlanma, sitoplazmik alan üzerindeki reseptör dimerizasyonunu ve tirozin kalıntılarının otofosforilasyonunu indükler.
Sitoplazmik adaptör proteinler bu kalıntılara bağlanır ve fosforile hale gelerek sinyali aşağı akış sinyalizasyo
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin