JoVE Deneyler Ansiklopedisi
İmmünoloji
0 görüntülenme • 3:58 dk. • July 8th, 2025
B hücrelerinin immünomanyetik negatif ayrımını gerçekleştirmek için, kanın pıhtılaşmasını önlemek için insan periferik kanını antikoagülan içeren bir tüpte toplayın. Diğer kan hücrelerini etkilemeden eritrositleri parçalamak için kırmızı kan hücresi, RBC, lizis tamponu ekleyin.
Süpernatantta kalan daha az yoğun parçalanmış RBC'lerden sağlam, daha yoğun kan hücrelerini çökeltmek için santrifüjleyin. Süpernatanı atın. Peleti taze ortamda tekrar askıya alın.
Hücreleri bir kültür plakasına aktarın. B hücreleri de dahil olmak üzere yapışık olmayan hücreler süspansiyon halinde kalırken makrofajların ve monositlerin plakaya yapışmasına izin vermek için inkübe edin.
Süspansiyon halindeki hücreleri yeni bir tüpe toplayın. Hücreleri peletlemek için santrifüjleyin ve bir tampon içinde yeniden süspanse edin.
B hücreleri dışındaki kan hücrelerine özgü biyotinile antikorlar içeren bir kokteyl çözeltisi ekleyin. Antikorlar, B olmayan hücrelerin yüzeyindeki antijenlere bağlanır ve B hücrelerini etiketlenmemiş halde bırakır.
merkezkaç. Bağlanmamış antikorlar içeren süpernatanı atın.
Streptavidin konjuge manyetik boncuklardan oluşan bir çözelti ekleyin. İnkübasyon sırasında, mikroboncuklar üzerindek
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin