JoVE Deneyler Ansiklopedisi
İmmünoloji
0 görüntülenme • 4:00 dk. • July 8th, 2025
Kemik iliği stromal hücreleri, BMSC'ler - iskelet dokusu soylarının ataları - hematopoietik kök hücreler, HSC'ler ve farklılaşmış kan hücreleri dahil olmak üzere heterojen bir hücre popülasyonu ile birlikte kemik iliği boşluğu içinde bulunur.
BMSC'leri izole etmek için, taze hasat edilmiş bir fare kaval kemiği ile başlayın. Kemik iliği boşluğunu ortaya çıkarmak için kemiğin proksimal ve distal uçlarını kesin. Kesilen kemiği ortam içeren uyarlanmış bir mikrofüj tüpüne yerleştirin.
Kemik iliğini kemikten çıkarmak ve tüpün dibinde bir kemik iliği peleti oluşturmak için yüksek hızda santrifüjleyin. Kemiği tüpten çıkarın. Bir şırıngaya bağlı bir iğne kullanarak, topakları kırmak için kemik iliğini ezin.
Süspansiyona orta ekleyin. Kemik parçalarını çıkarmak için uygun ağ boyutuna sahip bir hücre süzgecinden süzün. Kemik iliği hücreleri içeren süzüntüyü plastik bir kültür plakasına yerleştirin.
Uygun süre boyunca inkübasyon sırasında, BMSC'ler plastik kültür plakasının dibine yapışır ve çoğalır, HSC'ler de dahil olmak üzere yapışmayan hücreler süspansiyon halinde kalır.
Yapışmayan hücreleri içeren ortamı atın. BMSC'leri plakadan ayırmak için tripsin kullanın. Tripsini inaktive etmek için
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin