JoVE Deneyler Ansiklopedisi
İmmünoloji
0 görüntülenme • 4:17 dk. • July 8th, 2025
Doğal öldürücü hücreleri veya NK hücrelerini izole etmek için - doğuştan gelen bağışıklıkta yer alan özel beyaz kan hücreleri, yağ içeren hücreler, eritrositler, granülositler, lenfositler ve kollajen açısından zengin bir hücre dışı matris veya ECM içinde sıkışıp kalmış diğer ilişkili hücreler dahil olmak üzere çeşitli hücre popülasyonları içeren insan karaciğer dokusu ile başlayın.
Dokuyu küçük parçalara ayırın ve bunları proteolitik bir enzim olan kollajenaz içeren bir tüpe aktarın. Kollajenaz kollajeni parçalar, matrisi bozar ve ECM'ye bağlı hücreleri gevşetir.
Tüpü bir doku ayrıştırıcıya yerleştirin. Bu mekanik ayrışma, gevşek bir şekilde bağlanmış hücreleri çözeltiye serbest bırakmak için ECM'yi daha da parçalar. Sindirilmemiş doku ve ECM parçalarını çıkarmak için içeriği filtreleyin ve çeşitli hücreler içeren süzüntüyü toplayın.
Hücreleri polivinilpirolidon veya PVP kaplı silika boncuklar içeren bir tampona yeniden süspanse edin. PVP boncukları, yağ içeren hücrelere seçici olarak bağlanır ve onları hücrelerin geri kalanından etkili bir şekilde ayırır.
Hücre popülasyonunu peletlemek için düşük hızda santrifüjleyin; enkaz ve boncuk bağlı yağ hücreleri içeren süpernatanı atın. P
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin