JoVE Deneyler Ansiklopedisi
İmmünoloji
0 görüntülenme • 3:14 dk. • July 8th, 2025
Doğal öldürücü NK hücreleri, tümörleri ve mikrobiyal enfeksiyonları ortadan kaldıran büyük granüler lenfositlerdir.
İçin ex vivo NK hücre genişlemesi, NK hücreleri de dahil olmak üzere heterojen bir lenfosit popülasyonu içeren periferik kan mononükleer hücrelerinin, PBMC'lerin bir süspansiyonunu alın. NK hücrelerini aktive etmek ve genişletmek için gerekli olan zara bağlı interlökin 21, mIL-21'i eksprese eden ışınlanmış besleyici hücreler - çoğalmayan lenfoblastoid hücreler - ekleyin.
Ko-kültürü, altta gaz geçirgen bir zar bulunan ve gaz değişimine izin veren özel bir kültür kuyusuna ekleyin. Hücreler, geçiş gerektirmeden uzun bir süre boyunca yerleşir ve çoğalır.
NK hücre proliferasyonu için interlökin 2, IL-2 ve interlökin 15, IL-15 - sitokinleri ekleyin. Fizyolojik koşullarda yeterli bir süre kuluçkaya yatırın.
Besleyici hücreler üzerindeki mIL-21, NK hücreleri üzerindeki spesifik bir heterodimerik reseptöre bağlanır. Eksojen IL-15 ve IL-2, ilgili reseptörlerine bağlanır. Bağlanma, hücresel yaşlanmayı sınırlayan ve uzun süreli NK hücre çoğalmasına yol açan gen ekspresyonunu aktive eden farklı aşağı akış sinyal yollarını indükler.
Akış sitometrisi kullanarak, NK hücre genişlemesi
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin