JoVE Deneyler Ansiklopedisi
İmmünoloji
0 görüntülenme • 3:58 dk. • July 8th, 2025
Vasküler yaralanmayı takiben, trombositler bir trombosit tıkacı oluşturmak ve doku onarımını başlatmak için yaralanma bölgesinde toplanır ve aktive edilir.
Trombositleri murin tam kanından arındırmak ve in vitro olarak aktive etmek için uygun bir yoğunluk gradyan ortamı alın. Kan örneğini dikkatlice ortamın üzerine yerleştirin. Trombositleri plazmadan ve kırmızı ve beyaz kan hücresi katmanlarından ayırmak için santrifüjleyin.
Trombositleri uygun bir boyama tamponu içeren iki yeni tüpe aktarın. Glisin-prolin-arginin-prolin amino asit dizisini içeren sentetik GPRP tetrapeptidini bir tüpe ve ardından trombine ekleyin.
Trombin, trombosit yüzeyi trombin reseptörlerinin spesifik hücre dışı alanlarını parçalayarak aşağı akış sinyal kaskadını başlatır ve trombositleri aktive eder. Aktive edilmiş trombositlerin granülleri, hızla zar yüzeyine yer değiştiren CD62P proteinini serbest bırakır.
GPRP tetrapeptidi, trombosit agregasyonunu başlatmak için aktive edilmiş trombositler üzerindeki zarı kapsayan integrin CD41/CD61'e bağlanan bir glikoprotein olan fibrinojeni bloke eder ve böylece aktive edilmiş trombositleri süspansiyonda tutar.
Trombosit içeren tüplere floresan işaretli anti-CD41 ve ant
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin