JoVE Deneyler Ansiklopedisi
İmmünoloji
0 görüntülenme • 4:25 dk. • July 8th, 2025
Testislerin seminifer tübülleri, germ hücrelerini besleyen Sertoli hücreleri içerir. Sertoli hücreleri sıkı bağlantılarla bağlanır ve hyaluronik asit açısından zengin bazal matrise sıkıca bağlanır. Sertoli hücrelerinin bu düzenlemesi, bağışıklık hücresinin tübüle girişini düzenler ve gelişmekte olan germ hücrelerini bozulmaya karşı korur.
Sertoli hücrelerini izole etmek için, fare testislerinden türetilen kısmen sindirilmiş seminifer tübüller içeren bir tüp ile başlayın. Bu tübüller, seminifer tübülleri çevreleyen düz kas hücreleri olan peritübüler hücrelerden yoksundur.
Tübüllere, hyaluronik asidin hidrolizi için gerekli olan hyaluronidaz ve DNaz içeren bir enzim kokteyli uygulayın.
Hyaluronidazlar tübüllere girer ve bir bazal polisakkarit olan hyaluronik asidi parçalayarak bazal matristen Sertoli hücre ayrılmasını başlatır ve germ hücrelerini çözeltiye bırakır. DNaz, çözeltideki herhangi bir DNA kontaminantını sindirerek hücre toplanmasını önler.
Enzimatik olarak sindirilmiş tübülleri bir tamponla yıkayın, artık enzimleri, hücresel parçaları ve germ hücrelerini çıkarın. Sindirilmiş tübülleri yeniden askıya alın ve süspansiyonu bir iğne şırınga tertibatına yükleyin.
Hidrodinamik k
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin