JoVE Deneyler Ansiklopedisi
İmmünoloji
0 görüntülenme • 4:02 dk. • July 8th, 2025
Nötrofil hücre dışı tuzaklar veya NET'ler, patojenleri yakalayan ve nötralize eden antimikrobiyal proteinlerle kompleks haline getirilmiş kromatin liflerinin ağ benzeri yapılarıdır. NET'ler, antimikrobiyal proteinleri özel sitoplazmik granüllerde depolayan bağışıklık hücreleri olan nötrofiller tarafından salgılanır.
NET oluşumunu in vitro olarak incelemek için, izole edilmiş nötrofillerin bir süspansiyonunu alın. Lipofilik bir proinflamatuar bileşik olan phorbol miristat asetat veya PMA ekleyin. Hücreleri plakalayın ve inkübe edin.
PMA, nötrofil zarını geçer ve sitoplazmaya girer, burada protein kinaz C veya PKC'ye bağlanır ve aktive eder.
Aktive edilmiş PKC, bir enzim kompleksi olan NADPH oksidazın sitoplazmik bileşenlerini fosforile etmek için aşağı akış sinyallemesini indükler ve plazma ve granül zarı üzerinde birleşmesine neden olur. Kompleks, reaktif oksijen türleri veya ROS üretir.
ROS, granüllerden proteazların ve antimikrobiyal proteinlerin salınmasına neden olur. Granül proteazlar, ROS ile aktive olan sitrülinasyon enzimleri ile birlikte çekirdeğe translokasyon yapar.
Granüler proteazlar kısmi histon bozunmasına neden olurken, sitrülinasyon enzimleri histon sitrülinasyonun
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin