JoVE Deneyler Ansiklopedisi
İmmünoloji
0 görüntülenme • 5:41 dk. • July 8th, 2025
Fare dalağını ve lenf düğümlerini bir hücre süzgeci üzerinde yumuşatın. Splenositleri ve lenfositleri toplamak için süzgeci uygun bir tamponla yıkayın.
Hücreleri, CD8 + olmayan hücrelere bağlanan biyotinile edilmiş bir antikor kokteyli ve manyetik anti-biyotin mikro boncukları ile inkübe edin.
Hücre süspansiyonunu manyetik bir sütundan geçirin. Manyetik kuvvet sayesinde, boncuk bağlı CD8+ olmayan hücreler kolon duvarına bağlanırken, CD8+ T hücreleri dışarı çıkar.
Ayrıştırılmış hücreleri yapay antijen sunan hücreler, aAPC'ler ile inkübe edin. Bunlar, antijen yüklü majör histouyumluluk kompleksi-immünoglobulin füzyon proteini, MHC-Ig ve anti-CD28 antikoru ile işlevselleştirilmiş manyetik nanopartiküllerdir.
Antijen yüklü MHC-Igs, antijene özgü CD8 + T hücreleri üzerindeki farklı reseptörlere bağlanır. Anti-CD28 antikorları, T hücresi CD28 reseptörleri ile etkileşime girerek T hücresi aktivasyonunu başlatır.
Manyetik nanopartiküller ve hücre karışımı içeren tüpü manyetik bir stand üzerine yerleştirin. aAPC'ye bağlı CD8 + T hücreleri manyetik alana çekilirken, spesifik olmayan CD8 + T hücreleri askıda kalır. Süpernatanı çıkarın.
Tüpü manyetik standdan çıkarın. T hücresi büyüme faktörü
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin