Primer Mast Hücrelerini Murin Periton Boşluğundan İzole Etme Tekniği

Mast hücreleri - enflamatuar mediatörlerle dolu sitoplazmik granüller içeren beyaz kan hücreleri - doğuştan gelen ve adaptif bağışıklık tepkilerinde önemli bir rol oynar.

Bağ dokusu tipi mast hücrelerini periton boşluğundan izole etmek için - karın organlarını barındıran sıvı dolu bir alan - sırtüstü pozisyonda sabitlenmiş ötenazi yapılmış bir fare alın. Karın duvarını açığa çıkararak sternuma kadar uzunlamasına bir kesi yapın.

Periton boşluğu, makrofajlar, lenfositler, polimorfonükleer lökositler ve mast hücreleri dahil olmak üzere çeşitli bağışıklık hücrelerini barındıran sıvı içeren karın duvarının altında yer alır.

Hücreleri periton lavajı ile izole etmek için - intraperitoneal içeriği aspire ederek - kan sızıntısını önleyerek organları delmeden periton boşluğuna buz gibi soğuk bir büyüme ortamı enjekte edin. Soğuk ortam, hücre canlılığının korunmasına yardımcı olur.

Fareyi yeterli bir süre boyunca dikkatlice sallayın, bağışıklık hücrelerini ortamla karıştırın. Boşluğa boş bir şırınga yerleştirin. Ortamı yavaşça aspire edin - daha iyi hücresel verim için enjekte edilen sıvının çoğunu geri kazanın.

Hücre süspansiyonunu bir toplama tüpüne aktarın. Hücreleri bir pelet olarak çökel