Murin T Yardımcı Lenfositlerinin Radyoaktif İşaretli Monoklonal Antikorlar Kullanılarak Etiketlenmesi

Murin T yardımcısını, tavuk ovalbümin peptidine özgü bir T hücresi reseptörü olan TCR'yi taşıyan Th lenfositlerini radyo-etiketlemek için, istenen radyoaktif aktiviteye sahip radyoaktif işaretli monoklonal antikorlar, mAbs içeren bir tüp alır.

mAb, murin Th lenfosit zarında eksprese edilen TCR'ye özgü bir murin mAb içerir. Bir şelatör, mAb ve pozitron yayan bir bakır izotopunu konjugasyon yaparak kararlı bir kompleks oluşturur.

Radyoaktif işaretli mAb'leri tuzlu su ile seyreltin. Daha sonra, seyreltilmiş radyoaktif işaretli mAb'leri bir Th lenfosit süspansiyonu içeren çok kuyulu bir plakaya ekleyin. Kısaca kuluçkaya yatırın.

Kültür içinde, radyoaktif işaretli mAb'ler, Th lenfosit zarları üzerindeki TCR'lere bağlanır. İnkübasyon sonrası, hücre süspansiyonunu yeni bir tüpe aktarın.

merkezkaç. Bağlanmamış radyoaktif işaretli antikorlar içeren süpernatanı atın. Th lenfositlerini ortamda yeniden süspanse edin ve çok kuyulu bir plakaya aktarın. Uzun süre kuluçkaya yatırın.

Radyoaktif işaretli mAb-TCR bağlanması, klatrin triskeliyonlarının bağlandığı ve klatrin kaplı bir çukur oluşturduğu plazma zarının sitoplazmik tarafına adaptör protein alımına neden olur.

Aksesuar proteinler, vezikülü