JoVE Deneyler Ansiklopedisi
İmmünoloji
0 görüntülenme • 4:12 dk. • July 8th, 2025
Antimikrobiyallerin bakteri agregatları üzerindeki etkisini incelemek için, Pseudomonas aeruginosa kültürünü, agrega oluşumunu destekleyen bir büyüme ortamında alın - enfeksiyon sırasında büyümeyi simüle edin.
Tasarlanmış bakteriler, bir floresan mikroskobu altında agrega tespiti için bir floresan proteini eksprese eder. Agregaların hacmini veya bakteriyel biyokütleyi hesaplamak için üç boyutlu olarak görüntüleyin ve zaman içinde biyokütledeki artışı görselleştirin, bu da bakteri üremesini gösterir.
Antibiyotiğe toleranslı olanları seçerken duyarlı bakterileri öldüren öldürücü bir konsantrasyonda katyonik bir antimikrobiyal peptit olan kolistin ekleyin.
Kolistin, bakteri dış zarındaki negatif yüklü lipopolisakkaritlere veya LPS'ye bağlanarak, LPS tek tabakasını stabilize eden katyonik köprülerin yerini alır - zar bütünlüğüne zarar verir.
Kolistin periplazmaya girer ve hücre zarındaki LPS'ye bağlanarak zarı bozar ve hücre lizizine neden olur. Bir karşı mekanizma olarak, bir bakteri alt kümesindeki spesifik genetik mutasyonlar, LPS'nin negatif yükünü nötralize eder. Bu modifikasyon, katyonik kolistinin daha az anyonik LPS ile elektrostatik etkileşimini inhibe ederek hücre ölümünü önl
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin