JoVE Deneyler Ansiklopedisi
İmmünoloji
0 görüntülenme • 3:05 dk. • July 8th, 2025
Bakteriyel yapışmaya duyarlı yapışkan epitel hücre tek tabakası içeren çok kuyulu bir plaka alın.
İstenen bakteri-epitel hücre oranını elde etmek için patojenik bir bakteri olan floresan proteini etiketli Pseudomonas aeruginosa ekleyin.
Bakterileri epitel hücrelerine yaklaştırmak için santrifüjleyin ve etkileşimleri kolaylaştırın.
Bakteriler üzerindeki proteinli lifler olan tip IV pili, epitel hücreleri üzerindeki spesifik glikolipidlere bağlanarak ve konakçı hücrelere bakteri yapışmasına aracılık ederek çok önemli bir rol oynar.
İnkübasyon sonrası, yapışmayan bakterileri uzaklaştırmak için bir tampon ile yıkayın. Hücre yapısını korumak için hücreleri sabitleyin.
Çekirdeği boyayan, AT açısından zengin DNA bölgelerine güçlü bir şekilde bağlanan floresan bir leke olan DAPI'yi ekleyin. Hücre kurumasını önlemek için hücreleri tamponla örtün.
DAPI ile boyanmış çekirdeğe sahip epitel hücrelerine bağlı GFP etiketli bakterilerin görüntülerini elde edin. Tek bir epitel hücresi üzerindeki yapışık bakterileri numaralandırın.
Doza bağımlı bir şekilde konak hücre başına artan yapışık bakteri, konak-patojen etkileşimlerinin niceliklendirilmesini sağlar.
Bakteriyel yapışma testi için, önceden kül
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin