JoVE Deneyler Ansiklopedisi
İmmünoloji
0 görüntülenme • 5:41 dk. • July 8th, 2025
Bir polimere bağlı hedef plazmitleri içeren transfeksiyon poliplekslerini alın. Plazmitler, bir peptit etiketine ve bir afinite etiketine kaynaşmış bir viral antijeni kodlar.
Polipleksleri, endozomların içindeki polipleksleri içselleştiren memeli hücreleri ile inkübe edin.
Polimer vezikül yırtılmasına neden olur. Serbest bırakılan plazmitler, hücre dışı olarak salgılanan viral antijeni eksprese eder.
Antijen ve kirleticileri içeren süpernatanı hasat edin. Düşük konsantrasyonda rakip bir ajan ekleyin.
Bir afinite kromatografisi sütununa yükleyin.
Afinite etiketleri, antijeni hareketsiz hale getirerek kolon reçinesine bağlanırken, rakip ajan spesifik olmayan bağlanmayı azaltır.
Rakip maddeyi düşük bir konsantrasyonda akıtın ve zayıf bağlı kirleticileri uzaklaştırın.
Güçlü bir şekilde bağlanmış antijenleri uzaklaştırmak ve onları ayrıştırmak için artan rakip ajan konsantrasyonları ile yıkayın.
Bakteriyel dış zar veziküllerini veya OMV'leri yüzeye bağlı bir yakalama proteini ile tanıtın ve inkübe edin.
Antijen peptit etiketleri, yakalayan proteinlere bağlanarak çok değerlikli bir antijen ekranına sahip bir OMV aşısı oluşturur.
OMV SpyCatcher saflaştırmasını gerçekleştirin. Bakteri çöze
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin