JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 5:51 dk. • July 8th, 2025
Transgenik bir fare yavrusu beyni alın.
Beyincik çıkarın ve beyni inceleyin. Floresan protein eksprese eden uyarıcı nöronlar içeren kortiko-hipokampal dokuyu ayırın.
Dokuyu tampon içeren bir kültür plağına aktarın.
Dokuyu kıyın ve papain içeren bir tüpe aktarın.
Papain, dokunun hücre dışı matrisini sindirir ve nöronlar da dahil olmak üzere hücreleri gevşetir.
Sindirilmiş dokuyu BSA proteinleri içeren bir tüpe aktarın, enzimatik aktiviteyi durdurun ve hücresel hasarı önleyin.
Dokuları mekanik olarak ayrıştırır, hücreleri serbest bırakır.
Kalıntı ve enzimler içeren süpernatanı santrifüjleyin ve çıkarın.
Hücreleri düşük floresan nöronal ortamda yeniden süspanse edin ve hücre agregatlarını uzaklaştırarak bir hücre süzgecinden süzün.
Floresan nöronları tanımlamak ve sıralamak için floresanla aktive edilen hücre sıralaması gerçekleştirin.
Sıralanan nöronları bir mikrosantrifüj tüpüne ve santrifüje aktarın. Nöronal ortamdaki nöronları yeniden askıya alın.
Çok kuyulu bir plakada poli-L-lizin kaplı lameller üzerindeki tohum nöronları. Nöronlar kaplanmış yüzeylere yapışır.
Nöronal medya ekleyin. Nöronal büyümeyi kolaylaştırmak için kuluçkaya yatırın.
İlk olarak, beyinciği inceleyin ve iki ya
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin