Serumsuz Monotabaka Kültürlerde Embriyonik Kök Hücrelerden Nöral Progenitörlerin Üretilmesi
JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 2:41 dk. • July 8th, 2025
Fare embriyonik kök hücre kültürü ile başlayın.
Ortamı ve hücre kalıntılarını temizlemek için hücreleri bir tamponla yıkayın.
Hücreleri şişe yüzeyinden ayırmak için bir enzim kokteyli ekleyin.
Enzimatik aktiviteyi durdurmak ve hücreleri bir tüpte toplamak için ortam ekleyin. Süpernatan içeren enzimleri santrifüjleyin ve atın.
Hücreleri serumsuz nöronal kültür ortamında yeniden süspanse edin.
Hücreleri jelatin kaplı çok kuyulu plaka kuyularına tohumlayın.
Kuluçkaya yatmak. Embriyonik kök hücreler jelatin kaplı yüzeye yapışır. Besinler, büyüme faktörleri ve hormonlar dahil olmak üzere medya bileşenleri, hücre çoğalmasını kolaylaştırır ve tek bir tabaka oluşturur.
Bu hücre yoğunluğunda, embriyonik kök hücreler optimal seviyelerde büyüme faktörleri ve sitokin üretir ve serbest bırakır.
Bu moleküller, embriyonik kök hücrelerin nöral progenitörlere farklılaşmasını kolaylaştırarak hücre içi sinyal yollarını tetikler.
Jelatini 500 mililitre ılık PBS ile karıştırın ve hücre kültürü kabının dibini, yüzeyi kaplamaya yetecek kadar çözelti ile kaplayın. Jelatin kaplanırken, fare embriyonik kök hücrelerinin subkonvient kültürünü PBS'de iki kez durulayın. Daha sonra kültüre 1 mililitre ayrışma re
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin