JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 3:14 dk. • July 8th, 2025
Hücre dışı bir matris üzerinde desteklenen insan nöral progenitör hücrelerinin veya NPC'lerin bir kültürünü alın.
NPC'ler bir floresan proteini ifade edecek şekilde tasarlanmıştır.
Ortamı atın ve kalan ortamı çıkarmak için hücreleri yıkayın.
Kültürü, matrisi bozan ve hücreleri ayıran enzimlerle inkübe edin.
Ayrılan hücreleri bir tüpe aktarın ve enzimatik etkiyi nötralize etmek için bir ortam ekleyin.
Hücreleri peletlemek için santrifüjleyin, süpernatanı atın ve NPC'leri bir nöronal farklılaşma ortamında yeniden süspanse edin.
NPC'leri fare astrositleri ve sıçan kortikal nöronlarından oluşan yerleşik bir ko-kültüre aktarın.
NPC'lerin kortikal nöronlar ve astrositlerle hücre hücre temasları ile birlikte, yerleşik ko-kültür tarafından salınan büyüme faktörleri, NPC'lerin olgun nöronlara farklılaşmasını teşvik eder.
Olgun nöronlar genişletilmiş hücresel süreçler sergiler ve sinaptik bağlantılar oluşturur.
Konfokal bir mikroskop altında, insan NPC'den türetilmiş nöronları görselleştirmek için floresan proteinlerden gelen sinyali kullanın.
İndüklenmiş pluripotent kök hücreler veya iPSC'ler ürettikten sonra, hücreleri metin protokolüne göre bir insan nöral progenitör hücresi veya NPC kült
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin