İndüklenmiş Pluripotent Kök Hücre Kaynaklı Serebral Organoidlerin Üretilmesi
JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 5:44 dk. • July 8th, 2025
Destekleyici bir matris üzerinde kültürlenmiş indüklenmiş pluripotent kök hücrelerin veya iPSC'lerin kolonilerini alın.
Kolonileri tek hücrelere ayırmak için enzimler içeren bir çözelti ekleyin.
Hücreleri bir tüpe aktarın, santrifüjleyin ve süpernatanı atın.
iPSC'leri bir büyüme ortamında yeniden askıya alın.
Hücreleri biyouyumlu polimer lifleri içeren bir mikroplakaya aktarın.
Polimer iskele üzerinde embriyoid cisimler veya EB'ler oluşturan iPSC'leri zorla toplamak için santrifüjleyin.
iPSC proliferasyonunu ve nöral kök hücrelere, progenitör hücrelere ve olgunlaşmamış nöronlara farklılaşmasını destekleyen bir nöral indüksiyon ortamına geçiş.
Kuluçka üzerine, hücreler kendi kendine organizasyona uğrar.
Embriyoid cisimciklerini çukurlu bir tabaka üzerine yerleştirin ve hücre dışı matris proteinleri içeren damlalar ekleyin.
EB'leri gömerek matrisi katılaştırmak için inkübe edin.
EB'leri bir nöral bakım ortamı içeren bir mikroplakaya aktarın. Kuluçkaya yatmak.
EB'ler, çıkıntılar ve tomurcuklanmalar oluşturmak ve olgun nöronlara farklılaşarak serebral organoidler oluşturmak için hücresel proliferasyona uğrar.
Ortamı bir pipetle aspire edin ve hücreleri bir kez DPBS ile yıkayın. Daha so
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin