Nöron-glia etkileşimlerini incelemek için dolaylı bir nöron-astrosit ko-kültür tekniği
JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 4:53 dk. • July 8th, 2025
Poli-D-lizin ile kaplanmış geçirgen bir membran eki içeren çok kuyulu bir plaka ile başlayın.
Kuyuya astrosit büyüme ortamı ekleyin ve özel bir glial hücre olan astrositleri eke ekleyin.
Elektrostatik etkileşimler yoluyla poli-D-lizin üzerinde hücre yapışmasına izin vermek için inkübe edin ve bir tek tabaka oluşturun.
Astrosit ortamını bir nöron kültürü ortamı ile değiştirin.
Bu eki, polimer kaplı bir lamel üzerine yapışmış birincil fare embriyonik nöronları içeren çok kuyucuklu bir plakaya aktarın.
İki hücre tipinin fiziksel olarak ayrıldığı ancak aynı kültür ortamını paylaştığı dolaylı bir nöron-astrosit ko-kültürü oluşturmak için kuluçkaya yatırın.
Astrositler, nöronun hayatta kalması ve büyümesi için gerekli olan çeşitli nörotrofik faktörleri salgılar.
Bu faktörler geçirgen destek yoluyla göç eder ve birincil nöronlarla etkileşime girer. Bu, farklılaşmalarını teşvik eder ve nöronal projeksiyonlar oluşturur.
Bu çıkıntılar uzar ve nöronlar arasında sinaptik bağlantılar kurar, bu da nöron-glial etkileşimleri gösterir.
Her bir parçayı mililitre poli-D-lizin başına 10 mikrogram ile kaplayın ve bir saat inkübe edin. Bir saat sonra, ekleri PBS ile iki kez yıkayın.
Bu arada, astrosit o
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin