JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 4:51 dk. • July 8th, 2025
Bir fare korteksini küçük parçalar halinde kesin ve tamponlanmış bir tuz çözeltisi içeren soğuk bir diseksiyon ortamına aktarın.
Hücre dışı matrisi ayırmak için sindirim enzimleri ekleyin.
Artık enzimleri çıkarmak için soğuk diseksiyon ortamı ile yıkayın.
Bu ortamı bir astrosit zenginleştirme ortamı ile değiştirin.
Ardından, doku parçalarını ayırmak için bir pipet kullanın.
Ayrışmamış dokuyu çıkarmak ve tek hücreler elde etmek için süspansiyonu bir süzgeçten geçirin.
Hücreleri pozitif yüklü polimer kaplı bir plakaya aktarın. Çalkalayarak inkübe edin.
Astrositler sıkıca yapışırken, gevşek bağlı nöronlar, mikroglia ve oligodendrositler ayrılır.
Zenginleştirme ortamı, olgun astrositleri bölen poligonal astrositlere dönüştürür.
Ayrılan hücreleri çıkarın ve astrositleri bir fosfat tamponu ile yıkayın.
Astrositleri ayırmak için sindirim enzimleri ekleyin.
Enzimatik aktiviteyi durdurmak için serum içeren bir ortam ekleyin. Astrositleri bir tüpte toplayın ve santrifüjleyin.
Süpernatanı atın. Tipik bir yıldız şeklindeki olgun astrosit yapısını teşvik etmek için bir astrosit olgunlaşma ortamındaki hücreleri yeniden süspanse edin.
Astrosit üretmek için kullanılacak herhangi bir kortikal dokuy
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin