JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 4:33 dk. • July 8th, 2025
Antibiyotik doksisiklin ile indüklenebilir sistem tarafından yönlendirilen nörogenin-2'yi aşırı eksprese eden, insan kaynaklı pluripotent kök hücreleri veya hiPSC'leri alın.
Bunları, çok kuyulu bir mikroelektrot dizisinin kuyucuklarındaki yapışma proteini kaplı aktif elektrot alanlarına aktarın.
HiPSC'lerin kaplanmış aktif elektrot alanlarına yapışmasına izin verin.
Nöral spesifik bir transkripsiyon faktörü olan nörogenin-2 aşırı ekspresyonunu indükleyen doksisiklin ile desteklenmiş ortam ekleyin.
Nörogenin-2 moleküler yolları tetikler ve nöral öncü hücrelere hiPSC farklılaşmasına yol açarken, medya bileşenleri hücrenin hayatta kalmasına yardımcı olur.
Astrositleri, elektrotun aktif alanına yapıştıkları mikro elektrot dizisi kuyularına yerleştirin.
Besiyeri nörojenik büyüme faktörleri, doksisiklin ve bir hücre büyüme inhibitörü içeren nörobazal besiyeri ile değiştirin.
İnhibitör, astrosit proliferasyonunu önler ve farklılaşmamış hiPSC'leri ortadan kaldırır.
Zamanla, sürekli nörogenin-2 ekspresyonu ve büyüme faktörleri, nöral öncü hücre farklılaşmasını nöronlara yönlendirir.
Ayrıca, medyayı astrosit sağkalımı için serum içeren nörobazal medya ile değiştirin.
Astrositler, nöron olgun
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin