JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 3:00 dk. • July 8th, 2025
Birden fazla mikro oluk ile birbirine bağlanan proksimal ve distal kuyucuklara sahip polimer kaplı bir mikroakışkan oda ile başlayın.
Proksimal kuyuya, gelişmekte olan motor nöronlar açısından zengin fare embriyonik omurilik dokularını yerleştirin.
Bunu bir besin ortamı ile iyice destekleyin. Nöron büyümesine ve polimer kaplı yüzeye yapışmasına izin vermek için inkübe edin.
Daha sonra, proksimal kuyucuğa büyüme faktörü içermeyen bir besin ortamı ekleyin.
Distal kuyularda, konsantrasyon ve hacim farklılıkları oluşturmak için büyüme faktörleri içeren daha yüksek hacimde besleyici ortam ekleyin.
Bu farklılıklar, daha uzun nöronal çıkıntılar olan aksonların, mikro oluklar yoluyla distal kuyulara doğru büyümesine neden olur.
Her iki oyuğa da bir floresan boya çözeltisi ekleyin.
Boya molekülleri nöronlara girer ve her iki uçta mitokondri ve asidik organelleri boyar.
Canlı konfokal görüntülemede, floresanla boyanmış organeller, nöral hücre gövdeleri ve aksonlar arasında her iki yönde hareket ederek motor nöronlarda aksonal taşımayı doğrular.
MFC'nin proksimal bölmesindeki tüm ortamı atın. Toplam dört mikrolitre hacminde bir pipetle tek bir omurilik eksplantını alın ve mağaraya mümkün oldu
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin