JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 4:51 dk. • July 8th, 2025
Ötenazi yapılmış bir sıçan alın.
Karnı açın, mesaneyi çıkarın ve tampona batırın.
Mesaneyi kesin ve yapışan yağ ve doku kalıntılarını çıkarın.
Mesaneyi tampon, santrifüj içeren bir tüpe aktarın ve kalıntıları temizleyin.
Dokuyu kollajenaz içeren bir solüsyona yerleştirin ve kıyın. Hücre dışı matrisi bozmak için daha fazla kollajenaz ekleyin ve hücreleri gevşetin.
Süpernatanı santrifüjleyin ve atın. Hücre-hücre bağlantılarını bozmak için tripsin ekleyin ve hücreleri serbest bırakın.
Tripsini inaktive etmek için protein içeren durulama ortamı ekleyin, ardından santrifüjleyin ve süpernatanı çıkarın.
Ortamdaki hücreleri yeniden süspanse edin; agregaları çıkarmak için filtreleyin ve tek hücreli bir süspansiyon elde edin.
Süpernatanı santrifüjleyin ve çıkarın. Ortamdaki hücreleri yeniden askıya alın.
Nöronal ve glial hücre bağlanmasını kolaylaştırmak için hücreleri kaplanmış lameller üzerine yerleştirin. Bağlı olmayan hücreleri çıkarın.
Hücresel olgunlaşmayı teşvik etmek, birincil nöronal ve glial kültür oluşturmak için büyüme faktörleri içeren nöron ortamı ekleyin.
Fareleri sterilize edilmiş bir cerrahi havluya yerleştirerek ve karnı açığa çıkararak başlayın. Karın boşluğunu açmak ve me
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin