Plastik Mikroakışkan Çipler Kullanılarak Bölümlere Ayrılmış Primer Murin Nöron Kültürü
JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 4:53 dk. • July 8th, 2025
Somatik rezervuarlar ve bölmelerin yanı sıra mikro oluklarla birbirine bağlanmış aksonal rezervuarlar ve bölmelerden oluşan plastik bir mikroakışkan çip alın.
Bölmeleri ve olukları doyurmak için bir ön kaplama solüsyonu ekleyin ve hava kabarcığı sıkışmasını önleyin.
Ana bölmeleri dolu bırakarak çözeltiyi aspire edin. Tampon ile yıkayınız.
Kuyucukları, nöronal yapışmayı kolaylaştıran sentetik bir polimer ile kaplayın. Tampon ile yıkayın ve talaşın kurumasını önlemek için kültür ortamı ekleyin.
Sıçan hipokampal nöronlarının bir süspansiyonunu tohumlamak için medyayı aspire edin.
Süspansiyonu somatik rezervuarlara yükleyin. Nöronlar somatik bölmeye girer ve bağlanır.
Kuyucuklara nöronal kültür ortamı ekleyin ve inkübe edin. Ortamda bulunan büyüme faktörleri nöronal büyümeyi kolaylaştırır.
Yavaş yavaş, nöronlar, mikro oluklar yoluyla aksonal bölmeye doğru büyüyen aksonlarını uzatır.
Olukların darlığı, nöronal hücre gövdelerinin girişini engelleyerek somatik ve aksonal bölgelerin fiziksel olarak ayrılmasını sağlar.
Başlamak için, steril bir çok bölmeli çipi bir Petri kabına yerleştirin. Çipin sol üst kuyucuğuna 100 mikrolitre ön kaplama çözeltisi ekleyin ve ana kanaldan bitişik kuyucuğa
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin