JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 2:12 dk. • July 8th, 2025
Genetik olarak değiştirilmiş astrositler içeren çok kuyulu bir plaka ile başlayın. Bu hücreler, bir astrosit ortamına yerleştirilmiş bir lamel üzerine yapıştırılır.
Bu genetik olarak değiştirilmiş hücreler, nöronlara geçişlerini zorlayan dönüşüm faktörlerini ifade eder. Bu sürece nöronal yeniden programlama denir.
Belirli moleküller ve B27 takviyesi içeren bir nöronal farklılaşma ortamı alın. Bu bileşenler birlikte, farklılaşma için gerekli besinleri ve faktörleri sağlar.
Astrosit ortamını nöronal farklılaşma ortamı ile değiştirin.
Astrositleri gerekli bir süre boyunca inkübe edin.
İnkübasyon sırasında, astrositler tarafından ifade edilen dönüşüm faktörleri, bir astrositin bir nörona dönüştürülmesini sağlayan bir dizi moleküler olayı tetikler.
Dönüştürülmüş nöronlar, tipik nöronlara benzer şekilde daha küçük hücre gövdelerine ve uzun süreçlere sahiptir.
49 mililitre temel kültür ortamına bir mililitre B27 takviyesi ekleyerek nöronal farklılaşma ortamı hazırlayın. 24 ila 48 saat sonra, hücrelerin transdüksiyon veya transfekte edilip edilmediğine bağlı olarak, astrosit ortamını kuyu başına bir mililitre nöronal farklılaşma ortamı ile değiştirin. Hücreleri 37 santigrat derecede% 9 kar
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin