Kan Kaynaklı Pluripotent Kök Hücrelerden Nöronal Hücre Üretimi

Kuyucukların dibine yerleştirilmiş cam lameller ile bir mikroplaka alın.

Lamelleri kaplamak için pozitif yüklü bir polimer ekleyin ve bağlanmamış polimeri çıkarmak için yıkayın. Lamelleri kaplamak ve bağlanmamış proteinleri aspire etmek için hücre dışı bir matris proteini ile muamele edin.

Kaplama, hücre yapışmasını kolaylaştıran bir kültür substratı görevi görür.

Kuyucuklara bir indüksiyon ortamı ekleyin ve kandan türetilmiş pluripotent kök hücrelerin veya BD-PSC'lerin bir süspansiyonunu ekleyin. Çeşitli hücre tiplerine farklılaşabilen bu hücreler, kan progenitör hücrelerinin yeniden programlanmasıyla üretilir.

Hücrelerin substrata yapışması için inkübe edin. İndüksiyon ortamındaki büyüme faktörleri ve besinler BD-PSC'leri nöral progenitör hücrelere dönüştürür.

Nöronal büyüme faktörleri içeren bir farklılaşma ortamı tanıtın ve inkübe edin, nöral progenitörlerin nöronal bir fenotipe farklılaşmasını tetikleyin, genişletilmiş hücresel süreçler ve hücre-hücre temasları sergileyin.

Cam lamelleri 4 oyuklu plakalara yerleştirin ve bunları çift damıtılmış suda 1 ila 5 seyreltilmiş poli-L-ornitin ile kaplayın. Lamelleri 37 santigrat derecede bir saat inkübe ettikten sonra, çift damıtılmış