Yetişkin Bir İnsan Beyninden Serbest Yüzen Dilim Kültürlerinin Hazırlanması

Dilimleme çözeltisine batırılmış bir insan beyin dokusunu ele alalım. Çözeltinin biyolojik pH'ı ve besin maddeleri, doku işlevselliğinin korunmasına yardımcı olur.

En dıştaki meninks tabakasını çıkarın ve düz bir yüzey oluşturmak için dokuyu kesin.

Dokudaki fazla çözeltiyi kurulayın. Kesilen dokuyu bir agaroz bloğu ile bir numune diskine takın ve kesitleme kolaylığı için dokuyu blokla temas halinde tutun.

Diski bir vibratom tampon tepsisine yerleştirin ve dokuyu buz gibi soğuk bir dilimleme solüsyonu ile kaplayın.

Vibratomu kullanarak, doku mimarisini koruyan tek tip dilimler oluşturun.

Gri ve beyaz maddenin tutarlı bir oranını sağlayarak fazla dokuyu kesin.

Dilimleri bir kültür ortamı içeren çok kuyulu bir plakaya yerleştirin ve inkübe edin.

Dilimler, serbest yüzen dilim kültürü olarak bilinen bir teknik olan eşit besin erişimini sağlamak için ortamda asılı kalır.

Doku canlılığını korumak için kültürü düzenli olarak nöral büyüme faktörü takviyeli bir ortamla doldurun.

Numuneyi dilimleme çözeltisi içeren bir Petri kabına aktarın. İnce cerrahi aletler kullanarak, kalan meninkslerin mümkün olduğunca çoğunu dikkatlice çıkarın. Deneysel tasarımın belirli özelliklerine sahip dilimler ür