Retinanın nöronal dokusunun uzun süreli inkübasyonu için bir teknik

Yapay beyin omurilik sıvısında veya aCSF'de sağlam bir fare gözü alın ve retinayı içeren vizör lastiğini izole etmek için kesin.

Nöronal hücreleri açığa çıkaran iç sınırlayıcı zarı çıkarmak için enzimatik bir çözelti ile muamele edin.

Sindirimi durdurmak için dokuyu bir inhibisyon solüsyonuna batırın ve fazla solüsyonu çıkarmak için yıkayın.

Dokuyu koruyarak hücresel metabolizmayı yavaşlatmak için dokuyu düşük sıcaklıkta özel bir inkübatöre yerleştirin.

Bu inkübatör, dokuları monte etmek için bir ağa sahip bir ana odadan oluşur. Hazne aCSF ile doldurulur ve doku işlevselliğini korumak için sıcaklığı ve pH'ı kontrol edilir.

Mikrobiyal kontaminasyonu ortadan kaldırmak için, aCSF başka bir odaya pompalanır ve herhangi bir mikrobu öldürmek için ultraviyole radyasyon ile muamele edilir.

Sterilize edilmiş aCSF daha sonra ana hazneye geri pompalanır.

Retinayı izole etmek için vizör lastiğini çıkarın, retinayı çevreleyen dokudan ayırın ve inkübatöre geri koyun.

Retinal tüm montaj hazırlığı için, ötenazi yapılmış bir hayvanın gözlerini hemen enüklee edin. Ora serrata boyunca küçük bir kesik yapın ve gözleri oda sıcaklığında karbojen kaynağı olan Ames Media veya aCSF'ye yerleştirin. Bundan s