Fare Subkallozal Bölgesinden Erişkin Nöral Kök Hücrelerin İzolasyonu ve Kültürlenmesi
JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 5:31 dk. • July 8th, 2025
Soğutulmuş bir beyin matrisinde bir fare beyni ile başlayın.
Subkallozal bölgeyi veya SCZ'yi içeren bölümleri elde edin. Bölümü soğuk bir fosfat tamponuna aktarın.
Diseksiyon mikroskobu altında, SCZ kısmını kesin.
Parçalanmış SCZ'yi daha küçük parçalar halinde doğrayın.
Bu parçaları bir sindirim tamponuna aktarın. Hücreleri dokudan ayırmak için inkübe edin.
Süpernatanı santrifüjleyin ve atın. Hücreleri uygun bir ortamda yeniden süspanse edin.
Hücreleri bir kültür plakasına aktarın ve spesifik büyüme faktörleri ekleyin.
Yetişkin nöral kök hücreler bölünerek nörosfer adı verilen kümeler oluşturur.
Hücre kümelerinde uygun olmayan besin dağılımı hücre büyümesini sınırlar.
Kümeleri dağıtmak için süpernatanı santrifüjleyin ve atın. Kümeleri bir ayrışma tamponunda yeniden askıya alın ve inkübe edin.
Tek hücreler oluşturmak için çözeltiyi yukarı ve aşağı pipetleyin.
Süpernatanı santrifüjleyin ve atın.
Hücreleri yeniden süspanse edin ve tek tabaka elde etmek için uygun bir ortama aktarın.
Diseke edildikten sonra, fare beynini soğuk PBS tamponuna aktarın ve fazla kanı çıkarmak için iki kez durulayın. Daha sonra, beyni buz üzerindeki beyin matrisine yerleştirin ve bir milimetre kalınlığında d
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin