JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 6:18 dk. • July 8th, 2025
Bir tümör içeren perfüze bir fare beynini ele alalım.
Perfüzyon basamağı, dolaşımdaki bağışıklık hücrelerini uzaklaştırır, ancak tümöre sızan hücreleri tutar.
Tümörü içeren dokuyu izole edin.
Şimdi, dokuyu mekanik olarak ayırın.
Mekanik kuvvet dokuyu gevşeterek hücreleri serbest bırakır.
Ayrışmış dokuyu bir tüpe aktarın.
Süpernatan içeren kalıntıları santrifüjleyin ve atın.
Dokuyu kollajenaz ve DNaz içeren bir sindirim solüsyonunda yeniden süspanse edin.
Kollajenaz, hücre dışı matrisi bozarak hücreleri serbest bırakır. DNaz, kirletici DNA'yı bozar.
Enzimatik aktiviteyi durdurmak için bir tampon ekleyin.
Hücre agregalarını çıkarmak ve tek hücreli bir süspansiyon elde etmek için süspansiyonu filtreleyin.
Süpernatanı santrifüjleyin ve atın.
Hücreleri yüksek yoğunluklu gradyan ortamında yeniden askıya alın. Şimdi, daha düşük yoğunluklu bir gradyan ortamıyla kaplayın ve net bir arayüze sahip bir ayırma gradyanı oluşturun.
Katmanları ayırmak için santrifüjleyin. Bağışıklık hücreleri, gradyan ortamlar arasındaki arayüzde toplanırken, hücre kalıntıları üstte yüzer.
Daha fazla analiz için bağışıklık hücrelerini toplayın.
Bu prosedürde, temiz, tek kenarlı bir tıraş bıçağı kullanarak, iki yar
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin