Hidrojel Mikro Sütunlar İçinde Astrosit İskeleleri Oluşturmak için In Vitro Bir Yöntem

Tanımlanmış çapta içi boş tüplerden oluşan bir mikro sütun teknesi içeren bir kültür kabı alın.

Bir hidrojelden yapılan mikro sütunlar, kurumayı önlemek için bir tampon ile doldurulur.

Bir stereomikroskop altında, tamponu çıkarın ve hücre dışı matrisin bir bileşeni olan buz gibi soğuk bir kollajen çözeltisi ekleyin.

Kolon hidrasyonunu korumak için yemeğin iç kenarı boyunca bir ortam yerleştirin. Kollajenin polimerize olması için fizyolojik koşullar altında inkübe edin ve mikro sütunların içinde bir kaplama oluşturun.

Mikro sütunların içine astrositler ekleyin ve astrositin kollajene yapışmasını teşvik etmek için inkübe edin.

Daha sonra, çanağı ortamla doldurun ve fizyolojik koşullar altında tutun.

Mikro sütunların dar çapı nedeniyle, astrositler, uzunluk boyunca uzanan süreçlerle iki kutuplu bir morfoloji kazanır.

Zamanla, astrositler, yoğun astrosit süreçleri demetleri içeren üç boyutlu bir iskele oluşturmak için kendi kendine birleşir.

Hidrojel kaplı astrosit iskelesi, aşağı akış tahlilleri için hazırdır.

Bir biyogüvenlik kabininin içinde, ko-kültür ortamında mililitre başına 1 miligram sıçan kuyruğu tip I kollajen çözeltisi hazırlayın ve ardından buzun üzerine yerleştirin. ECM ç