Hematopoetik Progenitör Hücrelerin Nöral Kök Hücrelere Doğrudan Yeniden Programlanması

JoVE Encyclopedia of Experiments

Sinirbilim

0 görüntüleme • 3:05 dk • July 8th, 2025

Genetik olarak değiştirilmiş hematopoietik progenitör hücrelerin hücre süspansiyonu ile başlayın.

Bu hücreler, nöral kök hücrelere yeniden programlanmaları için gerekli transkripsiyon faktörlerini eksprese eder. Bu işleme doğrudan yeniden programlama denir.

Hücreleri, bir nöral progenitör ortamı ile hücre dışı matris kaplı çok kuyulu bir plakaya aktarın ve inkübe edin.

Hücre dışı matris, hücre bağlanması ve büyümesi için üç boyutlu bir iskele sağlar.

İnkübasyon sırasında, hematopoietik progenitör hücre tarafından eksprese edilen transkripsiyon faktörleri, nöral bir kök hücreye dönüşmesine izin veren bir dizi moleküler olayı başlatır.

Nöral progenitör ortam, indüklenmiş nöral kök hücrelerin hayatta kalmasını destekleyen faktörler içerir.

İnkübasyondan sonra, hücre çoğalmasını teşvik etmek için bu ortamı yeni bir nöral progenitör ortamla değiştirin.

Bir hücre kazıyıcı kullanarak hücreleri ayırın.

Bu süspansiyonu toplayın ve hücreleri iyi içeren bir nöral kök hücre ortamına aktarın.

İndüklenmiş nöral kök hücrelerin bakımı için inkübe edin.

Hücreler% 30 ila% 50 birleştiğinde, süpernatantı aspire edin ve rezerv yapın ve ardından her oyuğa 1 mililitre nöral progenitör ortam ekleyin. Süpernatanttaki küreleri kullanarak bir yedek plaka yapmak için, yedek süpernatanı 10 dakika boyunca 170 kez g'de santrifüjleyin.

Ardından, süpernatanı aspire edin ve peleti nöral progenitör ortamda yeniden süspanse edin. Matrigel kaplı 24 oyuklu bir plakada plaka; Hücreler %60 ila %80 birleşmeye ulaşana kadar, genellikle bir hafta sonra, her bir hücre plakasındaki ortamı her gün değiştirin.

Hücreler gerekli birleşme noktasına ulaştığında, süpernatanı aspire edin ve her oyuğa 1 mililitre nöral kök hücre ortamı ekleyin. Ardından, bir hücre kazıyıcı kullanarak hücreleri ayırın ve ardından çok nazik pipetleme yapın.

Daha sonra, hücreleri 24 oyuklu plakanın bir oyuğundan 6 oyuklu bir plakanın bir oyuğuna aktarın. Kuyuya bir mililitre daha orta ekleyin ve tüm kuyular için prosedürü tekrarladıktan sonra, 6 oyuklu plakayı 37 santigrat derece% 5 karbondioksit inkübatörüne yerleştirin.

Hücreler% 60 birleşmeye ulaşana kadar her gün tam ortam hacmini değiştirin. Her seferden sonra, hücreleri az önce gösterildiği gibi 1'e 3 oranında ayırın ve yeniden plakalayın.

11:22

Bir Co-kültür Sistemde nöronal bağlantıları Oluşumunda değerlendirilmesi için bir optogenetic Yaklaşım

İlgili videolar

0 Görüntüler

09:38

Fare Fibroblastlarının Melanositlere Doğrudan Yeniden Programlanması

İlgili videolar

0 Görüntüler

07:25

Fare Astrositlerinin İzolasyonu ve Doğrudan Nöronal Yeniden Programlanması

İlgili videolar

0 Görüntüler

09:36

Kaynaklı Nöronlar içine Yetişkin İnsan Beyninin perisit türetilmiş Hücreler Lineage yeniden programlama

İlgili videolar

0 Görüntüler

12:06

Periferik kan Hematopoetik Progenitör Hücreleri İnsan Sinir Kök Hücre Doğrudan İndüksiyon

İlgili videolar

0 Görüntüler

13:58

Yetişkin İnsan Fibroblastları türetilmesi ve Genişletilebilir Sinir Progenitör Hücreler içine Doğrudan Dönüşüm

İlgili videolar

0 Görüntüler

08:14

İnsan Pluripotent Kök Hücreleri Transkripsiyon Faktörleri aşırı ifadesinin doğrudan Hemogenic Endotelyumunun uyarılması ve Kan

İlgili videolar

0 Görüntüler

11:00

Transkripsiyon Faktörleri ile fare embriyonik fibroblastlar yeniden programlama bir Hemogenic Programı tetikleyebilecek

İlgili videolar

0 Görüntüler

14:37

İlkel ve kesin hematopoetik ataları insan Pluripotent kök hücrelerden farklılaşma yönetmen

İlgili videolar

0 Görüntüler

12:13

Periferik mononükleer hücrelerden Indüklenen nöral kök hücrelerin üretimi ve transplantasyon çalışmaları için Dopaminergic neuron precursors doğru farklılaşma

İlgili videolar

0 Görüntüler

Son güncelleme: 29 Ağustos 2026