Yüksek yoğunluklu bir nöronal besleyici katman kullanarak ultra düşük yoğunluklu bir nöronal kültür oluşturma

İki çok kuyulu plaka ile başlayın: biri bir polimer ile kaplanmış kazınmış bir tabana ve diğeri polimer kaplı bir lamel içerir.

Embriyonik nöronların yüksek yoğunluklu bir süspansiyonunu, kazınmış alt kısımla birlikte plakaya tohumlayın. Kuyu içeren lamel için ultra düşük yoğunluklu bir nöron süspansiyonu ekleyin.

Polimerlere nöronal bağlanmaya izin vermek için inkübe edin.

Lameli çıkarın ve yüksek yoğunluklu nöron kültürünün üzerine yerleştirin, böylece nöronların birbirine bakmasını sağlayın.

Yükseltilmiş yapılara sahip kazınmış yüzey, farklı yoğunluklardaki nöronları ayıran bir mikro boşluk oluşturur.

Yüksek yoğunluklu kültür, bir besleyici katman görevi görür ve nöral büyüme faktörünü salgılar.

Kapalı difüzyon alanı nedeniyle, büyüme faktörleri nöronların etrafında birikerek büyümelerini ve nöronal projeksiyonların gelişmesini kolaylaştırır.

Nöronal olmayan hücrelerin büyümesini seçici olarak inhibe eden sitozin arabinozit içeren bir nörobazal ortam tanıtın.

Nöronal kültürü korumak için düzenli olarak taze bir nörobazal ortamla doldurun.

Bu prosedürde, kültür başlığına yüksek yoğunluklu nöronlar için kazınmış tabanlara sahip 24 oyuklu plakalar yerleştirin. Önceden koşullandırıl