JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 2:22 dk. • July 8th, 2025
Bir farklılaşma ortamında süspanse edilmiş fare embriyonik kök hücrelerini veya mESC'leri alın ve inkübe edin.
Süspansiyon kültüründe, mESC'ler embriyoid cisimler veya EB'ler olarak adlandırılan bir yapı oluşturmak üzere toplanır.
EB'ler, gelişmekte olan bir embriyoyu taklit eden ve nöral hücrelere farklılaşabilen üç boyutlu agregalardır.
EB'leri bir tüpe aktarın ve yerçekimi ile yerleşmelerine izin verin.
Besin değeri tükenmiş ortamı çıkarın; EB'leri taze bir ortamda tekrar süspanse edin ve bir kültür kabına aktarın.
EB'lerin büyümesini kolaylaştırmak için süspansiyon kültürünü inkübe edin.
Ortamda asılı duran EB'leri çok kuyulu bir plakaya aktarın. Kuyucuklar, EB'lerin yapışmasına izin veren bir yapışma proteini ile kaplanmıştır.
Hücrelere giren ve bir transkripsiyon kompleksinin oluşumunu tetikleyen retinoik asidi tanıtın.
Kompleks, hücrelerin genişletilmiş hücresel süreçler sergileyen nöral progenitör hücrelere veya NPC'lere farklılaşmasını teşvik ederek gen ekspresyonunu indükler.
1.5 milyon fare embriyonik kök hücresini, 10 mililitre bazal farklılaşma ortamında yapışkan olmayan bir bakteri kabına ekleyin ve embriyoid vücut oluşumuna izin vermek için plakayı 37 santigrat derec
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin