JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 4:01 dk. • July 8th, 2025
Bir tüpte önceden yıkanmış duyusal gangliyonları alın.
Sindirim enzimlerinin bir karışımını içeren bir ayrışma çözeltisi ekleyin ve inkübe edin.
Bu enzimler hücre dışı matrisi parçalayarak tek tek hücreleri serbest bırakır.
İnkübasyondan sonra, ayrışma çözeltisini çıkarın.
Gangliyonları bir fosfat tamponu ile yıkayın ve taze bir ayrışma çözeltisi ekleyin.
Hücreleri ayırmak için gangliyonları yukarı ve aşağı pipetleyin.
Herhangi bir topaklanmayı çıkarmak için süspansiyonu bir hücre süzgecinden geçirin.
Süzgecin dibinden kalan hücreleri toplayın ve tüpe koyun.
Hücre süspansiyonunu bir yoğunluk gradyan tüpü ve santrifüj üzerine katmanlayın.
Şekil ve kütledeki farklılıklara bağlı olarak, hücreler alt katmana göç ederken, hücresel kalıntılar üst katmanda kalır.
Üst katmanı atın.
Kalan hücre süspansiyonuna ve santrifüje taze ortam ekleyin.
Süpernatanı atın ve duyusal gangliyon hücrelerini daha fazla kullanım için saklayın.
Duyusal gangliyonları topladıktan sonra, gangliyonları rahatsız etmeden her tüpten 500 mikrolitre ganglion ayrışma solüsyonu aspire edin. Daha sonra, her numuneye 1 mililitre PBS ekleyin ve ganglionların tüplerin dibine çökmesini bekleyin.
Daha sonra, PBS'yi çıkarın ve
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin