İnsan Glioblastoma Dokusundan Dilim Kültürlerinin Oluşturulması ve Sürdürülmesi

Glial hücrelerden kaynaklanan birincil bir beyin tümörü olan insan glioblastoma dokusunu ele alalım.

Kalan kanı çıkarmak için dokuyu buz gibi soğuk bir işlem ortamı kullanarak yıkayın.

Dokuyu parçalara ayırın ve erimiş agaroz içeren bir gömme kalıba yerleştirin.

Kalıbı soğutun, agarozun polimerize olmasına ve stabil bir jel matrisi oluşturmasına izin verin.

Doku bloğunu kalıptan çıkarın ve bir vibratomun numune plakasına sabitleyin.

Bloğu daldırmak için buz gibi soğuk işleme ortamını ekleyin. Doku canlılığını koruyarak ortamı havalandırmak için oksijenli bir gaz karışımından geçirin.

Gömülü tümör dokusunu ince dilimler halinde bölümlere ayırın.

Doku mimarisini korumak için buz gibi soğuk işleme ortamını içeren bir petri kabına bir dilim aktarın.

Daha sonra, doku dilimini, bir dilim kültürü bakım ortamı içeren bir kuyucukta geçirgen bir zar eki üzerine yerleştirin.

Dilimi fizyolojik koşullarda koruyun. Dilim kültürü, sonraki tahliller için hazırdır.

Kuyucuk başına 1 mililitre dilim kültürü bakım ortamı içeren altı oyuklu bir plakanın her bir oyuğuna boş PTFE kültür eklerini yerleştirmek için steril forseps kullanarak başlayın. Tüm ekler eklendiğinde, plakayı 37 santigrat derece ve%