Murin Kortikal Astrositlerin 3D Biyobaskısı İçin Bir Yöntem

Bir astrosit süspansiyonu alın.

Jelatin, fotoçapraz bağlanabilir jelatin türevleri, foto başlatıcılar, fibrinojen ve laminin içeren bir biyomürekkep çözeltisi ekleyin.

Süspansiyonu künt bir iğne ile bir şırıngaya aktarın.

Bioink jelleşmesi için şırıngayı soğutun. Şırıngayı biyoyazıcının yazıcı kafasına bağlayın.

İğneyi kültür plakasına uygun şekilde yerleştirin. Ayarlanan parametreler ve tasarımla biyo-baskıyı başlatın.

Astrosit içeren biyomürekkep iğneden dışarı itilir ve plaka üzerine katmanlar halinde biriktirilir ve sıkışmış astrositlerle üç boyutlu bir yapı oluşturur.

Biyobaskılı yapıyı ultraviyole ışığa maruz bırakın. Foto başlatıcı, jelatin türevi çapraz bağlamaya yardımcı olarak biyoyapı stabilitesini artırır.

Trombin ve kalsiyum iyonları ile tedavi edin.

Kalsiyum iyonları ile trombin, fibrinojeni fibrine dönüştürür ve kararlı bir 3D biyopolimer ağına monte eder.

Çözeltiyi atın ve çapraz bağlama maddelerini çıkarmak için tamponla yıkayın.

Astrosit ortamı ekleyin ve inkübe edin. Laminin, astrositlerin yapışmasına ve yayılmasına yardımcı olarak astrositler açısından zengin, 3 boyutlu sinir benzeri bir doku oluşturur.

Mililitre başına 1 x 10⁶ hücrelik bir nihai konsantrasyon e