JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 5:12 dk. • July 8th, 2025
Bir fare yavrusu beyni ile başlayın.
Beyinciği izole edin ve uygun kalınlıkta doku dilimleri elde edin.
Dilimleri, ortam içeren kültür plakası kuyucuklarına yerleştirilen membran eklerine aktarın.
Tedavi edilmiş kuyucuklarda, ortam bir nöroprotektif test bileşiği içerir. Kontrol kuyuları bileşikten yoksundur. Kuluçkaya yatmak.
Kontrol koşulları altında, serebellar Purkinje hücreleri, in vivo olarak erken doğum sonrası gelişimi taklit eden apoptoza uğrar.
Tedavi edilen kuyularda, potansiyeline bağlı olarak, bileşik hücreleri apoptozdan koruyabilir.
Hücresel bütünlüğü korumak için dilimleri yıkayın ve sabitleyin.
Hücre zarlarını geçirgen hale getirmek ve spesifik olmayan bağlanma bölgelerini bloke etmek için dilimleri geçirgenleştirme engelleyici bir çözeltiye aktarın.
Purkinje hücrelerinde spesifik olarak eksprese edilen kalsiyum bağlayıcı bir proteini hedefleyen birincil antikorlarla kaplama.
Primer antikorları hedef alan florofor konjuge sekonjene sekonder antikorları yıkayın ve ekleyin.
Çekirdekleri DNA bağlayıcı bir boya ile boyayın ve dilimleri birleştirin.
Konfokal bir mikroskop kullanarak, test bileşiğinin nöroprotektif potansiyelini belirlemek için canlı Purkinje hücrelerini
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin