Beyin Tümörü Hücre Süspansiyonundan Organoid Kültür Oluşturma

Laminin açısından zengin bir hücre dışı matris veya lrECM içeren bir mikrosantrifüj tüpü ile başlayın. Laminin, beyinde bol miktarda bulunan yapısal bir bileşendir.

IrECM polimerizasyonunu önlemek için tüpü buz üzerinde tutun.

Beyin tümörü hücrelerini ekleyin ve hücrelerin eşit dağılımını sağlamak için iyice karıştırın.

Daha sonra, karışımı damlacıklar oluşturan parafilm kalıplarına aktarın.

Hücrelerin doğal ortamını taklit eden bir iskele oluşturmak için lrECM polimerizasyonunu kolaylaştırmak için inkübe edin.

Şimdi, katılaşmış organoidleri bir kültür ortamı içeren bir Petri kabına yıkayın, ardından inkübe edin.

Kültür ortamı, hücre bölünmesini destekleyen temel besinleri ve büyüme faktörlerini sağlar.

Organoid içinde, hücreler göç ederek ve istila ederek kendi kendini organize eder.

İnkübasyondan sonra, organoidleri yerleştirmek için plakayı eğin.

Fazla ortamı dikkatlice çıkarın ve taze ortam ekleyin.

Hafifçe çalkalayarak inkübe edin.

Bu, besinleri eşit olarak dağıtır ve organoid büyümesini artırır.

Tek hücreli bir süspansiyondan organoidler yapmak için, bir buz kovası veya soğuk bloktaki küçük bir santrifüj tüpüne uygun miktarda laminin açısından zengin hücre dışı matris veya lr