JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 4:08 dk. • July 8th, 2025
Yapışık bir bazal membran matrisi üzerinde kültürlenmiş insan kaynaklı pluripotent kök hücre kolonileri ile başlayın.
Spesifik bir hormon, büyüme faktörü ve küçük molekül inhibitörleri içeren bir serebellar farklılaşma ortamı ekleyin.
Kolonileri bir cam pipet kullanarak kaldırın ve ultra düşük bir bağlantı plakasına aktarın.
Düşük bağlanma yüzeyi, hücreleri süspansiyon halinde tutar ve üç boyutlu embriyoid cisimlere veya EB'lere toplanmalarını kolaylaştırır.
Hormon, büyüme faktörü ve inhibitörler, ilgili hedef bölgelerine bağlanarak kök hücrenin nöronal progenitörlere farklılaşmasını teşvik eder.
EB'leri, EB bağlanmasını kolaylaştırmak için sentetik bir polimer ve bir yapışma proteini ile kaplanmış kültür plakası kuyucuklarına aktarın.
Ortamı inhibitör içermeyen bir farklılaşma ortamıyla değiştirin.
Hücreler EB'lerden dışarıya doğru göç etmeye başlar ve 2 boyutlu bir tek tabaka oluşturur.
Ortamı çıkarın ve bir serebellar olgunlaşma ortamı ekleyin.
Ortamdaki büyüme faktörleri, nöronal progenitörlerin farklı serebellar nöronal öncülere olgunlaşmasını indükler.
Sıfırıncı günde, 10 mikromolar Y27632 ile takviye edilmiş 1 mililitre serebellar farklılaşma ortamı ekleyin ve altı oyuklu ul
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin