JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 4:48 dk. • July 8th, 2025
Miyelinli sinir açısından zengin bir ortamda glial progenitör hücrelerden türetilen bir tümör olan yaygın intrinsik pontin glioma içeren beyin sapı dokusu parçalarıyla başlayın.
Dokunun hücre dışı matrisini bozmak için proteolitik enzimlerle tedavi edin.
İnkübasyondan sonra, hücre ayrışmasını ve miyelin kılıfının bozulmasını kolaylaştırmak için içeriği tekrar tekrar pipetleyin.
Hücreleri toplamak için filtreleyin ve santrifüjleyin. Süpernatanı çıkarın ve soğuk bir tamponda tekrar süspanse edin.
Yoğunluk gradyanı ayrımı için bir sükroz çözeltisi ekleyin ve iyice karıştırın.
Ardından, daha ağır hücreleri daha hafif miyelin kalıntılarından ayırmak için santrifüjleyin.
Miyelin tabakasını çıkarın ve bir RBC lizis tamponu ekleyin.
Lizis etkisini durdurmak için soğuk bir tampon ekleyin. Parçalanmış RBC'leri ortadan kaldırmak için süpernatanı santrifüjleyin ve çıkarın.
Hücreleri ılık bir nörobazal ortamda yeniden süspanse edin ve kaplanmamış bir şişede kültürleyin.
Nörotropik faktörlerin yokluğu nöronal ölüme neden olurken, glial progenitör hücreler besinleri ve büyüme faktörlerini kullanarak proliferasyona yol açar. Büyüme faktörü seviyelerini korumak için taze ortam ekleyin.
Zamanla, bu
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin