JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 3:49 dk. • July 8th, 2025
Bir sıçan kafası kası ile başlayın ve onu parçalara ayırın.
Bir proteolitik enzim kokteyli ekleyin ve hafifçe çalkalayarak inkübe edin.
Enzimler, dokunun hücre dışı matrisini sindirerek kas liflerini gevşetir.
Enzimleri inaktive etmek için serum proteinleri içeren ortam ekleyin.
Dokuyu bir tüpe aktarın, santrifüjleyin ve süpernatanı atın.
Ortamdaki dokuyu yeniden süspanse edin. Kas onarımı ve rejenerasyonu için çok önemli olan kök hücreler olan uydu hücrelerinin homojen bir süspansiyonunu elde etmek için mekanik bozulma ve santrifüjlemeyi iki kez tekrarlayın.
Uydu hücresi içeren süpernatanı toplayın.
Tek hücreli bir süspansiyon elde etmek için bir hücre süzgecinden geçirin. Santrifüjleyin, süpernatanı atın ve ortamdaki hücreleri yeniden süspanse edin.
Hücre süspansiyonunun damlalarını hücre dışı matriks protein kaplı oda kızağı kuyucuklarına yerleştirin.
Kaplanmış yüzey, uydu hücresinin bağlanmasını kolaylaştırır. Kuyulara medya ekleyin.
Ortamdaki büyüme faktörleri, uydu hücresi proliferasyonunu ve miyoblastlara farklılaşmayı indükler - kas hücresi öncüleri, bu da çok çekirdekli miyotüpler oluşturmak için daha fazla çoğalır ve birleşir.
Miyotüpler sonunda kas liflerine dönüşür.
Uyd
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin