Fare Embriyonik Karsinom Hücreleri kullanılarak Retinoik Asit Kaynaklı Nörogenez
JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 4:02 dk. • July 8th, 2025
Çeşitli hücre tiplerine farklılaşabilen bir fare embriyonik karsinom hücresi süspansiyonunu ele alalım.
Besiyeri ve retinoik asit içeren hidrofobik bir kültür kabı üzerindeki tohum hücreleri.
Kuluçkaya yatmak. Hidrofobik yüzeyler hücre yapışmasını önleyerek hücrelerin agregalar oluşturmasına neden olur.
Retinoik asit, hücre agregatlarına girerek sinyal yollarını tetikler ve nöronal progenitör hücrelere farklılaşmaya neden olur.
Kuluçka sonrası hücre agregalarını toplayın.
Medyayı atın.
Retinoik asit içeren besiyerini ekleyin ve agregaları hidrofobik bir kültür kabına tohumlayın.
Kuluçkaya yatmak. Retinoik asit, nöronlara sürekli hücresel farklılaşmayı kolaylaştırır.
Agregaları toplayın ve ortamı çıkarın.
Agregalar içindeki hücre-hücre adezyonlarını bozmak için bir proteolitik enzim ekleyin.
Enzimatik aktiviteyi durdurmak için serum içeren ortam ekleyin.
Agregaları mekanik olarak ayırın ve bir nöronal süspansiyon oluşturun.
Enzim açısından zengin süpernatanı santrifüjleyin ve atın.
Ortamdaki nöronları yeniden süspanse edin ve bunları ortam içeren çok kuyulu bir plaka üzerine tohumlayın.
Kuluçkaya yatmak. Nöronlar plakaya yapışır ve olgunlaşır, uzun çıkıntıları uzatır.
Agrega üretimi
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin