JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 2:25 dk. • July 8th, 2025
Kök hücreleri farklılaşmamış durumda tutan bir fibroblast besleyici hücre tabakası üzerinde kültürlenen embriyonik kök hücrelerle başlayın.
Hücreden hücreye yapışmayı bozmak ve hücreleri ayırmak için tripsin enzimleri ve EDTA ekleyin.
Daha sonra, enzim aktivitesini durdurmak için serumla zenginleştirilmiş bir kültür ortamı ekleyin ve hücre süspansiyonunu bir tüpe aktarın.
Hücreleri toplamak için santrifüjleyin, süpernatanı çıkarın ve ardından hücreleri retinoik asit içeren bir ortamda yeniden süspanse edin.
Bu hücre süspansiyonunun damlacıklarını yapışkan olmayan bir kültür kabının tabanına yerleştirin.
Asılı damlalar oluşturmak için tabanı ters çevirin ve damlacıkların kurumasını önlemek için bir tamponla doldurulmuş kültür kabı kapağının üzerine yerleştirin.
Asılı damlalarda, yerçekimi hücrelerin dibe yerleşmesine neden olur ve sonunda embriyoid cisimler olarak adlandırılan üç boyutlu yapılarda toplanır.
Ayrıca, hücreler çeşitli hücre içi sinyal yollarını modüle eden retinoik asidi emer.
Bu modülasyon, kök hücrelerin nöron üretme kabiliyetine sahip nöral progenitör hücrelere farklılaşmasını uyarır.
37 santigrat derecede,% 5 karbondioksitte% 2 ila 5 dakika boyunca% 0.25 tripsin-ED
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin