Vestibüler Ganglion Nöronlarının Bir Fare İç Kulağından İzole Edilmesi

Bir fare yavrusunun kafasının yarısını alın ve beynini çıkarın.

Kafatasının üst kısmını kesin ve iç kulak yapılarını koruyan kemikli bir dış tabaka olan otik kapsülü görselleştirmek için çevredeki dokuyu çıkarın.

Dokuyu tamponlu bir ortam içeren bir kültür plakasına aktarın.

Vestibüler sinir hücresi gövdelerini içeren superior ve inferior vestibüler gangliyonları ayırın.

Kemikli sırtı tıraş edin ve alttaki üstün ganglionu hasat edin.

Superior ganglionu, tamponlu ortamı içeren yeni bir plakaya aktarın.

İzole edilmiş ganglionu temizlemek için yapışan dokuları yüzeyden çıkarın.

Gangliyonu proteolitik enzimler içeren bir çözeltiye yerleştirin.

Enzimler, dokunun hücre dışı matrisini bozarak hücreleri gevşetir.

Gangliyonu, kültür ortamı içeren polimer kaplı cam tabanlı bir tabağa aktarın ve hücreleri serbest bırakmak için dokuyu mekanik olarak ayırın.

İnkübe edin, hücrelerin yapışmasına ve vestibüler bir ganglion nöron kültürü oluşturmasına izin verin.

Kapalı cerrahi makas kullanarak ötenazi yapılmış farenin beynini çıkarın. Beyni kafatasından tamamen ayırmak için kraniyal siniri kesin ve çıkarın. Başın arkasından başlayarak, şeffaf membranöz materyali forseps ile çekin ve ardından cerra